PRODUCCIÓN DE INULINASAS EXTRACELULARES POR EL HONGO Purpureocillium lilacinum
EXTRACELLULAR INULINASE PRODUCTION BY THE FUNGUS Purpureocillium lilacinum
Ismael Acosta1, Lisset Ávila1, Adriana Rodríguez2, Juan F. Cárdenas2, Víctor M. Martínez3, Nancy C. Pacheco1 (1) Universidad Autónoma de San Luis Potosí, Facultad de Ciencias Químicas, Laboratorio de Micología Experimental, Av. Dr. Manuel Nava No. 6, Zona Universitaria, CP 78320 San Luis Potosí, SLP – México (2) Unidad Académica Multidisciplinaria Zona Media, Carretera Río Verde san Ciro km 4.5, Colonia Puente del Carmen, CP 79617 Río Verde, San Luis Potosí, SL P – México (3) Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, Instituto de Ciencias Agropecuarias, Área Académica de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Rancho Universitario, Av. Universidad Km. 1 Ex-Hda. de Aquetzalpa, AP 32, CP 43600 Tulancingo, Hidalgo – México
Resumen
El objetivo de este trabajo fue analizar la producción de inulinasa extracelular por el hongo Purpureocillium lilacinum en medio de Mathur modificado suplementado con diferentes carbohidratos e inulina comercial como fuente de carbono, a diferentes pH´s y fuentes de nitrógeno, determinando los azúcares reductores del hidrolizado por el método de Nelson modificado por Somogy, utilizando como sustrato inulina comercial al 1.0 % (p/v) en regulador de acetatos 50 mM pH= 5.0. Además, se analizaron algunas características bioquímicas, como la estabilidad a 4oC y 28oC, pH y temperatura óptimos, el efecto de la concentración de proteína y sustrato, siendo los mejores inductores inulina de achicoria (AE 14.8), glucosa (AE 5.2) y ácido poligalacturónico, a los de 7 días de incubación y ácido glutámico como fuente de nitrógeno, a un pH de 4.0. Además, la actividad enzimática fue muy estable a 4oC, pH 5.5, y 6 horas de incubación.
Abstract
The objective of this work was to analyze the extracellular inulinase production by the fungus Purpureocillium lilacinum in modified Mathur’s medium supplemented with different carbohydrates and commercial inulin as a carbon source, at different pH’s and nitrogen sources, determining the reducing sugars of the hydrolysate by the Nelson method modified by Somogy, using as substrate commercial inulin at 1.0% (w/v) in 50 mM acetate buffer pH= 5.0. In addition, some biochemical characteristics were analyzed, such as stability at 4oC and 28oC, optimum pH and temperature, the effect of protein and substrate concentration, the best inducers being chicory inulin (EA 14.8), glucose (EA 5.2) and polygalacturonic acid, at 7 days of incubation and glutamic acid as a nitrogen source, at pH of 4.0. In addition, the enzymatic activity was very stable at 4oC, pH 5.5, and 6 hours of incubations.
Palabras clave: inducción, inulinasas extracelulares, caracterización, Purpureocillium lilacinum Keywords: induction, extracelluar inulinases, characterization, Purpureocillium lilacinum